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薄层层析硅胶板制造和操作措施

文章泉源:本站人气:5321揭晓时间:2016-07-22年夜

  薄层层析硅胶板就是我们通常所说的硅胶板要明确薄层层析硅胶板制造与操作措施必须先知道:薄层层析(TLC)的原理;薄层层析法是一种微量而快速的剖析措施,操作容易,装备请求低,但关于每种被分另外物质都须要各自自力的措施,TLC主要应用于氨基酸、多肽、糖脂、核苷酸和生物碱类多种物质的划分和剖断。其主要原理为凭证样品组分与吸附剂的吸附力及其在展层溶剂中的分配系数的不合而使混淆物划分。

薄层层析硅胶板

  薄层层析硅胶板操作措施

  a. 硅胶板于100℃烘箱活化30 min; 冷却后,在距底端2cm 处划直线,用铅笔悄悄标出点样职位,两个点样点浅易距离1-1.5 cm;

  b. 点样,每次点样量浅易为0.8 μL(视情形而定),点样点要尽能够小,如需加量,待点样点逝世板后再在统一点上第二次、第三次点样。每次点样都要在上次点样点逝世板落先行,防止点样点太过疏散影响实验效果;

  c. 室温逝世板后,快速将点好样的硅胶板放入已延迟加入睁开剂的层析缸,密封层析缸,泉源展层;

  d. 待展层剂上沿距离硅胶板上部边缘2 cm时取出硅胶板,室温风干后于50℃烘箱烘干5 min,取出,待硅胶板冷却后放入层析缸阻拦第二次展层;推荐产物:发泡硅胶板

  e. 展层终了后室温逝世板并选择合适的显色措施阻拦显色并盘算其Rf值。

  显色措施:薄层色谱的显色措施有许多,一些通用的显色措施以下:紫外照射法、荧光试剂法及紫外照射法等;但凭证待测物的不合要选择合适的显色措施。

  以上就是薄层层析硅胶板制造和操作措施仅供参考,瑞博橡胶提醒你:在操作或实验的时间应当重视一下几点。

  1.样品的熔化:将样品溶于睁开剂极性相近、挥发性高的无机溶剂。

  2.点样:控制上样量,点样基线距底边2.0 cm,控制样点直径(5 mm)及点间距离(1-1.5 cm),防止因疏散而影响检测(下图),点样时必须重视勿毁伤薄层外面。

  3. 展层:展层容器必须密封,延迟加入睁开溶剂,使溶剂蒸气到达平衡。睁开剂不克不及高于上样点,否则,没法求得Rf值和准确断定粗产物中各组分在薄层板上的相对职位。

  4. 睁开剂的选择条件:有优胜的熔化性、使待划分组分间脱离、待测组分的Rf值在0.2~0.8之间、不与待测组分或吸附剂发生化学回声、沸点适中,黏度较小、睁开后组分黑点圆且集中、混淆溶剂最好用新鲜配制。

  5. 边缘效应:边缘效应是样品在层析时,薄层板双方的黑点比中央黑点移动快,并向双方偏斜。其启事是用混淆溶剂睁开时,极性较弱和沸点较低的溶剂在薄层板双方缘处较易挥发,使薄层板上的睁开剂比例纷歧,而泛起边缘效应,处置赏罚赏罚边缘效应最有用的措施是剪去薄层板浸入睁开剂一真个两角。

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此文要害词:薄层层析硅胶板